安徽农业科学

2008, (26) 11260-11262

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

PRRSV Hn-1/06株GP5蛋白基因的克隆及表达载体的构建
Cloning and Construction of Expression Vector of GP5 Gene of PRRSV Hn-1/06 Strain

卢高峰;夏平安;邱璜;李伟娟;王中明;刘明莉;

摘要(Abstract):

[目的]克隆PRRSVHn-1/06株GP5蛋白基因并构建其原核表达载体。[方法]根据PRRSV美洲株ATCC-VR2332的ORF5基因序列设计特异性引物,用RT-PCR方法从Hn-1/06株中扩增得到GP5蛋白基因的片段,与PTG19-T载体连接获得其阳性克隆PTG19-T-ORF5。以该基因片段为模板分别设计ORF5完整序列和删除信号肽的ORF5序列两条引物,进行PCR扩增,将目的片段与原核表达载体pET32a连接,并对其进行酶切鉴定。[结果]扩增得到GP5蛋白基因全长序列603 bp,编码200个氨基酸残基;具有3个潜在的N-糖基化位点和9个半胱氨酸;分子量为22.4 kD,等电点为8.550;双酶切pET32a-ORF5鉴定,结果与预期一致,证实重组质粒构建成功。[结论]成功构建了PRRSVHn-1/06株GP5蛋白基因的表达载体,为深入研究GP5蛋白的本质与功能及其致病性奠定基础。

关键词(KeyWords): PRRSV;GP5基因;RT-PCR;表达载体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 卢高峰;夏平安;邱璜;李伟娟;王中明;刘明莉;

Email:

DOI:

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享