安徽农业科学

2010, v.38;No.317(28) 15500-15502

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橙色红曲菌pyrG缺陷株的筛选及鉴定
Screening and Identification of Orange Monascus Aurantiacus pyrG Mutant

王伯华;许杨;李燕萍;

摘要(Abstract):

[目的]筛选和鉴定橙色红曲菌pyrG缺陷株。[方法]以橙色红曲菌AS3.4384(Monascus aurantiacus)为出发菌株,运用紫外照射致基因突变,随后对尿嘧啶依赖型菌株的pyrG基因进行测序比对,筛选pyrG基因突变株,最后用含有米曲霉pyrG基因的pAOP互补质粒对其进行基因转化试验。[结果]经紫外诱变得到一株尿嘧啶依赖型的5-FOA抗性菌株UM28。扩增其pyrG基因并进行测序,发现UM28的pyrG基因在核苷酸序列+220bp的位置发生了突变,进而导致氨基酸水平上Pro→Ser的突变,造成了乳清苷-5'-磷酸脱羧酶的失活。UM28通过基因转化能够接受含有米曲霉pyrG基因的互补质粒恢复野生表型,且回复突变率低于10-8,能够用于红曲菌同源转化系统的构建。[结论]获得了一株红曲菌pyrG基因缺陷株UM28,它可被用作基因工程的受体菌。

关键词(KeyWords): 红曲菌;pyrG缺陷株;紫外诱变;同源转化系统

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30860123)

作者(Author): 王伯华;许杨;李燕萍;

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参考文献(References):

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