安徽农业科学

2009, v.37;No.267(14) 6369-6371+6386

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黄河鲤生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达
Cloning of cDNA for Growth Hormone of Cyprinus carpio haematopterus and Its High Efficient Expression in Prokaryocyte

陈丽丽;王松涛;杜启艳;常重杰;

摘要(Abstract):

[目的]研究黄河鲤生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达。[方法]从黄河鲤脑垂体中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增并克隆黄河鲤的生长激素(GH)基因cDNA,分析其核苷酸序列和推测的氨基酸序列。[结果]经克隆得到的黄河鲤生长激素基因的开放阅读框包括633个核苷酸,编码210个氨基酸,其中包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽。将GH成熟肽的cDNA扩增并克隆入表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达N端含6个组氨酸的融合多肽。SDS-PAGE结果表明,0.1 mmol/L IPTG诱导表达的蛋白约为23.5 kD,其表达量超过蛋白总量的50%,主要为不溶性的包涵体。包涵体经尿素溶解和亲和层析,获得了单一蛋白条带。[结论]该研究克隆到黄河鲤的生长激素基因,构建其原核表达质粒,得到了高效表达的基因工程菌。

关键词(KeyWords): 黄河鲤;生长激素;基因克隆;原核表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30771666)

作者(Author): 陈丽丽;王松涛;杜启艳;常重杰;

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参考文献(References):

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