安徽农业科学

2007, (36) 11766-11767

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编码结构域Tt APuX25基因片段的分离与克隆
Isolation and Cloning of the Gene Fragment Encoding Tt APuX25 Domain

谢晚彬;谢和芳;

摘要(Abstract):

[目的]将Tt apux25基因片段克隆到表达载体pET21a(t)中。[方法]以热产硫化氢高温厌氧杆菌菌液为模板,根据编码结构域Tt APuX25的基因片段Tt apux25设计1对特异引物进行PCR扩增。将Tt apux25克隆到表达载体pET21a(+)中,筛选阳性克隆并对其进行测序鉴定。[结果]通过PCR扩增获得一个250~500bp的扩增片段。对获得的阳性克隆进行筛选和测序鉴定,发现所得阳性克隆为表达载体pET21a(+)中插入有序列正确的Tt apux25片段。阳性克隆中的重组质粒被命名为pEX25,并将其转化进表达宿主菌大肠杆菌Tuner感受态细胞中。[结论]该方法直接将Tt apux25基因片段克隆到表达载体pET21a(+)中,操作简便并取得了较好的效果。

关键词(KeyWords): 热产硫化氢高温厌氧杆菌;结构域TtAPuX25;PCR扩增;克隆

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 重庆市自然科学基金项目;; 宜春学院校级科研课题

作者(Author): 谢晚彬;谢和芳;

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