安徽农业科学

2018, v.46;No.596(19) 114-116

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创伤弧菌快速检测法的建立
Development of Rapid Detection of Vibrio vulnificus

徐宸;王鑫;钟江;

摘要(Abstract):

[目的]针对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,基于单克隆斑点杂交技术进行改良,建立一种创伤弧菌快速检测方法。[方法]由水产品牡蛎中分离获得一株创伤弧菌FD-1,以其灭活全菌为抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。在此基础上,对传统斑点杂交技术进行优化改进,以化学发光试剂ECL替代传统TMB底物,进一步提高其灵敏度、缩短检测时间和简化操作步骤。[结果]与传统斑点杂交法相比,改良斑点杂交法的检测时间可缩短至2 h,检测限可达1×10~5CFU/m L。[结论]改良斑点杂交法比传统TMB底物斑点杂交法(1×10~7CFU/m L)灵敏度提高了100倍,操作过程简单,在水产品检验和医疗诊断方面具有良好的开发应用前景。

关键词(KeyWords): 创伤弧菌;杂交瘤技术;单克隆抗体;斑点杂交;ECL

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 徐宸;王鑫;钟江;

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