安徽农业科学

2010, v.38;No.299(10) 5248-5250

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A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测
Expression,Purification and Activity Detection of VP1 of A-type FMDV

李菁;林彤;高闪电;丛国正;独军政;邵军军;常惠芸;

摘要(Abstract):

[目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带;His-VP1可与A型口蹄疫病毒豚鼠灭活阳性血清发生特异性的反应。[结论]表达及纯化了具有高特异性的A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1,为深入研究结构蛋白VP1在口蹄疫病毒致病机制中的作用奠定了基础。

关键词(KeyWords): A型口蹄疫病毒;结构蛋白VP1;表达及纯化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家科技支撑计划(2006BAD06A14);; 转基因重大专项(2008ZX08011-004)

作者(Author): 李菁;林彤;高闪电;丛国正;独军政;邵军军;常惠芸;

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