安徽农业科学

2010, v.38;No.315(26) 14265-14267

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实时荧光定量PCR检测对虾白斑综合症病毒方法的建立
Establish of Real-time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detecting White Spot Syndrome Virus

程晓艳;刘庆慧;黄倢;

摘要(Abstract):

[目的]根据对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的保守序列,利用Primer5.0软件设计引物,建立了WSSV的荧光实时定量PCR检测体系。[方法]构建含有WSSV目扩增片段的质粒为标准品,进行定量PCR扩增,探索反应条件。[结果]确定了最佳退火温度(61℃)和最佳引物浓度(0.2μmol/L),标准品浓度在8.8×109~8.8×104个拷贝数之间有典型的"s"型扩增曲线,标准曲线中模板拷贝数(X)与Ct值的关系为Ct=-3.597lgX+42.547,相关系数R2=0.993。[结论]该检测方法特异性强,对传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)、肝胰腺细小病毒(HPV)没有扩增反应。

关键词(KeyWords): 实时荧光定量PCR;白斑综合症病毒;检测

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30871942);; 国家重点基础研究项目(2006CB101801);; 对虾行业专项(200803012)

作者(Author): 程晓艳;刘庆慧;黄倢;

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