安徽农业科学

2008, (03) 893-894+907

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龙眼AFLP银染体系的建立与优化
Establishment and Optimization of Suitable Silver-stained AFLP Reaction System in Longan

李冬波;朱建华;李鸿莉;黄凤珠;李江舟;潘丽梅;

摘要(Abstract):

[目的]优化龙眼AFLP银染体系中的影响因素。[方法]以23份龙眼品种和2份龙眼近缘植物龙荔为试材,通过对扩增片段长度多态性(AFLP)反应体系中的几个影响因素(DNA提取、酶切与连接、电泳与银染)进行研究,建立起龙眼AFLP银染分析体系。[结果]用紫外分光光度计检测样品DNA质量和浓度,发现提取的DNA吸光度A260/A280比值在1.8左右,A260/A230的比值大于2.0,说明所提取的DNA样品纯度较高,无蛋白质或盐类的污染。酶切与连接中采用37℃水浴5 h,然后转入65℃水浴2 h的方法能保证酶切充分,又能防止酶切过度。电泳和银染时用4℃预冷的显影液进行显影,可以降低显影速度。[结论]采用该技术体系得到的AFLP指纹式样清晰,重复性强,适宜用作龙眼品种鉴别和遗传多样性分析。

关键词(KeyWords): AFLP;龙眼;银染

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广西科学基金项目(桂科自0728070,桂科自0339023);; 广西农科院科技发展基金2005001Z

作者(Author): 李冬波;朱建华;李鸿莉;黄凤珠;李江舟;潘丽梅;

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