安徽农业科学

2015, v.43;No.482(13) 63-64+104

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拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定
Construction of Arabidopsis CDR6 Over-expression Carrier and Identification of Stably Transgenic Lines

董万春;樊婷婷;阳立波;江海坤;张其安;方凌;倪娇娇;管灵霞;曹树青;

摘要(Abstract):

[目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株。[方法]提取拟南芥mRNA,反转录成c DNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T4DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的p XB094载体上;然后转化至Trans1-T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认。将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株。[结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至p XB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株。[结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): 拟南芥;CDR6基因;过量表达载体;转基因植株

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 安徽省自然科学基金青年基金项目(1308085QC56);; 安徽省科技攻关项目(1201a0301009)

作者(Author): 董万春;樊婷婷;阳立波;江海坤;张其安;方凌;倪娇娇;管灵霞;曹树青;

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