安徽农业科学

2015, v.43;No.472(03) 25-28

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农杆菌介导创伤胚转化的应用
Trauma Embryo of Genetic Transformation System with Agrobacterium Mediated Method

张丽君;刘龙龙;张建珍;孙毅;康国帅;周建平;崔林;

摘要(Abstract):

[目的]优化农杆菌介导创伤胚转化的方法,提高转化率,培育具有特定功能的转基因品种,改善作物的生存能力和生态环境适应力。[方法]参照农杆菌划胚介导植物萌发种子基因转化方法,以燕麦、玉米和高粱的萌发种子为试验材料,农杆菌菌株LBA4404(含质粒P3301ubi Ac)侵染转化燕麦、玉米和高粱的萌发种子,优化转化条件,探索燕麦、玉米和高粱遗传转化体系,探讨菌液浓度、种子萌发时间、超声波功率、乙酰丁香酮和草丁膦浓度对3种作物的影响并进行比较分析。[结果]农杆菌菌液浓度为0.6>OD600≥0.4时转化效果最佳;第1次超声波功率为900 W,处理时间为10 min;第2次超声波功率为200 W,处理时间为4 min效果最佳。转化效率最高;添加乙酰丁香酮对燕麦、高粱和玉米的发芽有明显促进作用,但转化效果有明显区别;燕麦、玉米和高粱的转化植株对草丁膦的耐受性差异不大,与非转化植株相比,0.8 mg/L除草剂胁迫下燕麦、玉米和高粱种子萌发受到一定程度的抑制。用1 mg/L除草剂溶液对T0和T1代转化植株幼苗进行筛选,转化植株的存活率高于对照。[结论]经除草剂筛选和PCR对T0和T1代幼苗检测,初步证明获得了转化植株。

关键词(KeyWords): 植物转化;燕麦;玉米;高粱

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家燕麦荞麦产业技术体系(CARS-08-A-1);; 山西省农科院博士基金项目(YBSJJ209)

作者(Author): 张丽君;刘龙龙;张建珍;孙毅;康国帅;周建平;崔林;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.03.009

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