安徽农业科学

2009, v.37;No.270(17) 7897-7899

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矮牵牛花特异表达启动子PchsA的克隆及蓝色基因F3′5′H表达载体的构建
Cloning of the Specific Expression Gene Promoter-PchsA of Petunia hybrida Flower and Construction of F3′5′H Gene Expression Vector

李吉莲;姚宁涛;祝建波;邓福军;

摘要(Abstract):

[目的]克隆花特异表达启动子PchsA,将此启动子与蓝色基因"F3′5′H"构建新的表达载体,拟以该启动子驱动"F3′5′H"在其他花色中特异表达。[方法]根据GenBank报道的矮牵牛启动子的序列设计并合成一对特异引物,以蓝紫色矮牵牛总DNA为模板,用PCR仪扩增目的片段。[结果]PCR扩增出的启动子DNA片段长约550 bp,回收后连接到PGM-T质粒载体上,经转化、筛选确定重组子,酶切鉴定后送上海生工生物工程公司测序,得到片段长度为553 bp。经DNAMAN软件分析和GenBank上BLAST序列比对,显示序列与已报道序列同源性为98.55%。应用pcgene软件进行序列分析,结果表明试验克隆的启动子含有启动子所必须的所有调控元件,这与报道的序列基本一致。[结论]试验成功地克隆了CHSA启动子并将其与"F3′5′H"构建成能够在植物中进行遗传转化的表达载体,为培育新型花色新品种奠定了基础。

关键词(KeyWords): 矮牵牛;PchsA启动子;克隆;蓝色基因F3′5′H;表达载体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 新疆生产建设兵团重大科技攻关项目(2006GG20);; 新疆生产建设兵团科技攻关项目(2006GG03);; 兵团博士资金“转基因棉花杂交棉育种技术新体系的建立”项目

作者(Author): 李吉莲;姚宁涛;祝建波;邓福军;

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