安徽农业科学

2012, v.40;No.374(13) 7739-7741+7803

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微小隐孢子虫miR-2980真核表达载体的构建及初步鉴定
Construction and Preliminary Identification of Eukaryotic Expression Vector of Cryptosporidium parvum miR-2980

呼高伟;程天印;米荣升;秦培兰;黄燕;周鹏;曹薇;陈兆国;

摘要(Abstract):

[目的]构建微小隐孢子虫的miR-2980真核表达载体,并进行鉴定。[方法]从微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)基因组DNA扩增cp-miR-2980前体,克隆到pMD18-T载体上,经测序鉴定正确后亚克隆到pVAXⅠ载体上,转染HCT-8细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR检测cp-miR-2980的表达。[结果]成功构建了cp-miR-2980真核表达载体pVAX-miR2980,RT-PCR检测证实其能在真核细胞HCT-8中表达。[结论]构建的真核表达载体pVAX-miR2980能在HCT-8细胞中成功表达cp-miR-2980,为后续研究cp-miR-2980的功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): cp-miR-2980;前体;真核表达载体;RT-PCR

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家科技重大专项项目(2012ZX10004220-008);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB12,2012JB16);; 上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2005)第3-4号]

作者(Author): 呼高伟;程天印;米荣升;秦培兰;黄燕;周鹏;曹薇;陈兆国;

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参考文献(References):

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