Bt基因介导的大豆抗蚜虫表达载体的构建Construction of Bt Gene-mediated Aphids-resistant Expression Vector in Soybean
袁成志;高美玲;张艳馥;
摘要(Abstract)：
[目的]构建用于大豆抗蚜虫研究的Bt基因介导的Cry1Ac植物表达载体。[方法]以含有Cry1Ac的质粒pRH201为模板进行PCR扩增,将PCR产物克隆至载体质粒pBS中,将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α,并对重组质粒进行酶切和测序鉴定。经验证的Cry1A基因扩增产物双酶切后与pBI121载体连接转化,挑取重组子pBIC121进行BamHⅠ/SnaBⅠ双酶切鉴定。[结果]从pRH201质粒中扩增获得长约3.5 kb的Cry1Ac基因序列,对重组质粒pBSCRY的插入片段进行测定,确定了Cry1Ac片段的全长为3 534 bp,共编码1176个氨基酸。[结论]构建了Cry1A基因的植物表达载体,为大豆抗蚜虫转基因研究奠定了基础。
关键词(KeyWords)： Bt基因;Cry1Ac基因;农杆菌介导;大豆;表达载体
基金项目(Foundation): 黑龙江省2008年研究生创新科研资金项目(YJSCX2008-169HLJ);; 黑龙江省教育厅项目(10551331)
作者(Author): 袁成志;高美玲;张艳馥;
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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.23.081
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