盐生植物盐穗木HcPS_H基因大肠杆菌表达载体的构建Constructing of a E.coli Expression Vector of HcPS_H Gene from Halostachys caspica
郝晓燕;张毓露;足木热木;刘小利;
摘要(Abstract):
[目的]构建盐穗木HcPS_H基因的大肠杆菌表达载体。[方法]以质粒pGEM-T-HcPS_H为模板,HcPS_H-pET28a-F、HcPS_H-pET28a-R为引物进行PCR扩增,获得两端含酶切位点的HcPS_H基因目的片段。将该目的片段与大肠杆菌表达载体pET-28a通过T4DNA连接酶连接,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,得到重组子克隆,抽质粒进行测序鉴定。[结果]扩增出HcPS_H基因片段长度为441 bp,将其连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上后,得到重组子质粒,经PCR检测、双酶切验证及测序鉴定,表明成功构建原核表达载体。[结论]该研究成功构建了盐穗木HcPS_H基因的大肠杆菌表达载体,为进一步进行该基因功能的研究奠定了基础。
关键词(KeyWords): 盐生植物;盐穗木;HcPS_H基因;原核表达载体
基金项目(Foundation): 新疆维吾尔自治区农作物生物技术重点实验室开放课题(XJDX0201-2011-05)
作者(Author): 郝晓燕;张毓露;足木热木;刘小利;
Email:
DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.10.203
参考文献(References):
- [1]俞仁培,陈德明.我国盐渍土资源及其开发利用[J].土壤通报,1999,30(4):158-159.
- [2]陶大勇.盐穗木研究进展[J].安徽农业科学,2007,35(20):6083-6084.
- [3]王彦芹,贺江舟,赵小亮,等.塔里木盆地荒漠植物花花柴和碱蓬耐盐、耐旱性比较[J].基因组学与应用生物学,2009,28(6):1128-1134.
- [4]曾幼玲,蔡忠贞,马纪,等.盐分和水分胁迫对两种盐生植物盐爪爪和盐穗木种子萌发的影响[J].生态学杂志,2006,25(9):1014-1018.
- [5]蔡伦.新疆盐生植物耐盐相关基因的克隆、序列分析与功能初步检测[D].乌鲁木齐:新疆大学,2005.
- [6]郗金标,张福锁,毛达如,等.新疆盐渍土分布与衍生植物资源[J].土壤通报,2005,36(3):299-303.
- [7]刘成都,邱庆崇,耿晓雪,等.黄鳝抗菌肽hepcidin基因大肠杆菌表达载体的构建[J].安徽农业科学,2011,39(9):5245-5246.
- [8]马晨,马履一,刘太祥,等.盐碱地改良利用技术研究进展[J].世界林业研究,2010,23(2):28-32.