安徽农业科学

2012, v.40;No.371(10) 5758-5759

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盐生植物盐穗木HcPS_H基因大肠杆菌表达载体的构建
Constructing of a E.coli Expression Vector of HcPS_H Gene from Halostachys caspica

郝晓燕;张毓露;足木热木;刘小利;

摘要(Abstract):

[目的]构建盐穗木HcPS_H基因的大肠杆菌表达载体。[方法]以质粒pGEM-T-HcPS_H为模板,HcPS_H-pET28a-F、HcPS_H-pET28a-R为引物进行PCR扩增,获得两端含酶切位点的HcPS_H基因目的片段。将该目的片段与大肠杆菌表达载体pET-28a通过T4DNA连接酶连接,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,得到重组子克隆,抽质粒进行测序鉴定。[结果]扩增出HcPS_H基因片段长度为441 bp,将其连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上后,得到重组子质粒,经PCR检测、双酶切验证及测序鉴定,表明成功构建原核表达载体。[结论]该研究成功构建了盐穗木HcPS_H基因的大肠杆菌表达载体,为进一步进行该基因功能的研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): 盐生植物;盐穗木;HcPS_H基因;原核表达载体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 新疆维吾尔自治区农作物生物技术重点实验室开放课题(XJDX0201-2011-05)

作者(Author): 郝晓燕;张毓露;足木热木;刘小利;

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