安徽农业科学

2010, v.38;No.325(36) 20538-20541

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玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子的克隆与特异表达
Cloning and Expression of the Promoter of Maize Starch-Branching Enzyme sbeⅡb Gene

徐亚维;王丕武;柴晓杰;

摘要(Abstract):

[目的]构建玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。[方法]LA-PCR扩增了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子序列,并克隆到pMD18-TVector上。再将启动子克隆到pBI121载体上,构建植物表达载体pBI121-sbeⅡb。把GUS基因连到pBI121-sbeⅡb上构建pSBE-GUS后利用农杆菌介导法转化烟草。分别进行PCR和Southern杂交检测,并对经基因枪轰击和农杆菌介导的烟草种子、根、茎及叶进行GUS组织化学分析和荧光检测。[结果]测序结果与GenBank中发表的玉米sbeⅡb基因启动子同源性达98.52%。共培养和筛选培养后获得4株转pSBE-GUS植株,叶片仅有少量蓝斑出现,而根和茎部未见蓝斑,但烟草种子有大量蓝斑显出,初步推断sbeⅡb基因启动子能启动GUS在种子中特异表达。[结论]成功构建了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因种子特异表达启动子。

关键词(KeyWords): 淀粉分支酶;启动子;扩增;表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家转基因植物中试与产业化基地建设专项基金项目(J99-13-001);; 吉林农业科技学院青年基金项目

作者(Author): 徐亚维;王丕武;柴晓杰;

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