安徽农业科学

2008, v.36(35) 15386-15388

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O型口蹄疫病毒结构蛋白基因VP1的克隆与原核表达
Cloning and Prokaryotic Expression of VP1 Gene of Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV) Type O

付薇;陈磊;熊毅;潘琼;王常伟;陈进喜;胡晓静;刘棋;

摘要(Abstract):

[目的]为进一步研究口蹄疫病毒的诊断方法提供理论依据。[方法]根据GenBank上已公布的O型口蹄疫病毒核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,通过RT-PCR扩增VP1基因,将其克隆至表达载体pGEX-6p-1中,经测序鉴定目的基因正确地整合至表达质粒中,用IPTG诱导重组基因表达。[结果]通过PCR扩增获得682 bp的目的片段,所克隆的VP1基因在原核细胞中成功表达,表达产物为融合蛋白,经SDS-PAGE鉴定分子量为51 kD,Western Blot结果表明融合蛋白具有免疫原性。[结论]获得了猪O型口蹄疫VP1融合蛋白,可作为包被抗原用于口蹄疫诊断试剂盒的研制。

关键词(KeyWords): 口蹄疫病毒;VP1;克隆;表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广西科技厅科技攻关项目(桂科攻0779001)

作者(Author): 付薇;陈磊;熊毅;潘琼;王常伟;陈进喜;胡晓静;刘棋;

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参考文献(References):

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