安徽农业科学

2008, (10) 4002-4006

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甘蓝型油菜乙酰辅酶A羧化酶3个亚基基因的克隆及其表达
Cloning of 3 Subunit Genes of Acetyl-CoA Carboxylase from Brassica napus L.and Their Expression in Escherichia coli

武玉永;谭秀华;马立新;

摘要(Abstract):

[目的]为构建乙酰辅酶A羧化酶的叶绿体表达载体奠定基础。[方法]以从甘蓝型油菜叶片中提取的叶绿体基因组DNA为模板进行PCR扩增,克隆羧基转移酶β亚基基因。以从开花20~29 d后油菜幼胚中提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增,克隆生物素羧化酶和生物素羧基载体蛋白的cDNA序列。最后,乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因被克隆到大肠杆菌表达载体中。[结果]SDS-PAGE分析结果表明乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因分别被克隆到大肠杆菌表达载体中。乙酰辅酶A羧化酶的3个亚基基因在大肠杆菌中的表达产物分别为76.6、44.0和81.5 kD,其融合蛋白分别占总菌体蛋白的12%、10%和6%。[结论]不同品种的甘蓝型油菜生物素羧基载体蛋白cDNA序列存在较大差异。

关键词(KeyWords): 甘蓝型油菜;乙酰辅酶A羧化酶;基因克隆;基因表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 湖北省自然科学基金项目(2003ABA118)

作者(Author): 武玉永;谭秀华;马立新;

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