安徽农业科学

2019, v.47;No.622(09) 105-107

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柽柳cpSSR-PCR反应体系的建立和优化
Establishment and Optimization of cpSSR-PCR Reaction System of Tamarix chinensis

张如华;张连梅;

摘要(Abstract):

[目的]建立并优化柽柳cpSSR-PCR反应体系和反应条件。[方法]对影响PCR反应的5个变量(Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度)进行L_(16)(4~5)正交试验设计,并对引物退火温度进行梯度筛选。[结果]最优反应体系:Mg~(2+) 2.0 mmol/L、dNTPs 0.125 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.25 U、引物0.25μmol/L、模板DNA 20 ng,共10μL。反应程序:94℃预变性4 min;94℃30 s,引物退火温度30 s,72℃30 s,30个循环;72℃延伸10 min。[结论]该反应体系成功扩增1个柽柳天然群体的23个个体,为柽柳群体扩散路线的确定奠定基础。

关键词(KeyWords): 柽柳;叶绿体微卫星;反应体系;正交试验

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 临沂大学博士科研启动基金项目(2015A0031)

作者(Author): 张如华;张连梅;

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参考文献(References):

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