安徽农业科学

2018, v.46;No.594(17) 105-107

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春兰SRAP-PCR反应体系的建立与优化
Establishment and Optimization of SRAP-PCR Reaction System of Cymbidium goeringii

袁媛;孙叶;李风童;包建忠;陈秀兰;

摘要(Abstract):

[目的]构建适合春兰SRAP-PCR反应的最佳体系。[方法]对影响PCR反应的5个变量(dNTPs浓度、Mg~(2+)浓度、引物浓度、Taq酶量、模板DNA用量)采用L16(45)正交试验设计,建立春兰SRAP-PCR最适反应体系。[结果]最佳优化体系为0.25 mmol/L d NTPs、2.50 mmol/L Mg~(~(2+))、0.80μmol/L引物、1.00 U Taq酶、200.00 ng模板DNA,共20μL。扩增程序:94℃预变性4 min,反应前5个循环在94℃变性1 min、35℃复性1 min、72℃延伸1 min的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高至50℃,最后72℃延伸10 min。[结论]该体系有利于SRAP分子标记在春兰材料上的应用,为春兰分子遗传育种奠定了基础。

关键词(KeyWords): 春兰;SRAP-PCR;正交试验设计;体系优化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 江苏省农业科技自主创新项目[CX(16)1023]

作者(Author): 袁媛;孙叶;李风童;包建忠;陈秀兰;

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