安徽农业科学

2013, v.41;No.402(05) 1916-1917+2164

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菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达
Cloning and Prokaryotic Expression of Coat Protein Gene from Bean Pod Mottle Virus

魏晓棠;白桦;尼秀媚;张京宣;宋涛;

摘要(Abstract):

[目的]克隆菜豆荚斑驳病毒(BPMV)外壳蛋白(CP)基因,并对其进行原核表达。[方法]利用RT-PCR方法克隆BPMV CP基因,将其连接至pMD19-T Simple载体后对阳性克隆进行测序,检测其与已知病毒外壳蛋白基因序列的同源性;将CP基因定向插入双酶切的pET30a,构建其原核表达载体并转化大肠杆菌BL-21表达重组蛋白。[结果]试验克隆得到的CP基因大小为1 122 bp,与NCBI中目标基因的相似度达99%以上;试验成功构建了原核表达载体pET30a-BPMV CP,发现重组蛋白在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导4 h条件下表达量最高。[结论]该研究为BPMV抗血清的制备与液相芯片检测方法的建立奠定了基础。

关键词(KeyWords): 菜豆荚斑驳病毒;外壳蛋白;表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家质检总局项目(2011IK170)

作者(Author): 魏晓棠;白桦;尼秀媚;张京宣;宋涛;

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