安徽农业科学

2009, v.37;No.265(12) 5398-5399+5584

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小鼠激活素受体相互作用蛋白2的原核表达及抗血清制备
Prokaryotic Expression and Preparation of Antiserum for Mouse Activin Receptor-interacting Protein 2

陈希曙;

摘要(Abstract):

[目的]克隆小鼠激活素受体相互作用蛋白2(ARIP2)cDNA序列,利用大肠杆菌表达ARIP2,制备兔抗小鼠ARIP2的多克隆抗血清。[方法]采用RT-PCR方法,将小鼠ARIP2基因克隆到pET-32a(+)质粒,构建ARIP2原核表达载体并转化到大肠杆菌,IPTG诱导融合蛋白的表达,经亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白,免疫家兔后制备ARIP2抗血清,分别采用ELISA,Western blot检测抗体效价和特异性。[结果]测序结果表明重组质粒pET32a(+)-ARIP2构建成功;SDS-PAGE分析表明获得的重组蛋白为可溶蛋白;经过亲和层析后得到有效分离;Elisa法测定的抗血清效价为1∶50000;Western blot鉴定结果表明抗血清能与目的蛋白特异性结合。[结论]成功将ARIP2进行了原核表达并制备了高效价、高特异性的兔抗小鼠ARIP2抗血清,为进一步研究ARIP2功能提供了有力工具。

关键词(KeyWords): 小鼠ARIP2;原核表达;蛋白纯化;抗血清

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 陈希曙;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.12.024

参考文献(References):

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