安徽农业科学

2008, v.36(35) 15370-15372+15478

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pEGFP-N1-hTERT真核表达载体的构建与表达鉴定
The Construction and Identification of Eukaryotic Expression Vector pEGFP-N1-hTERT

李勇;李军;吕长荣;窦忠英;

摘要(Abstract):

[目的]构建pEGFP-N1-hTERT真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达。[方法]利用pC1-neo-hTERT和pEGFP-N1质粒构建重组质粒,通过双酶切鉴定、DNA测序分析验证人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)片段的准确性。将pEGFP-N1-hTERT真核表达载体转染到大鼠胎儿神经干细胞(NSCs)中,通过绿色荧光蛋白间接观察人端粒酶逆转录酶蛋白在细胞中的表达定位,通过RT-PCR、WesternBlot验证所构建的真核表达质粒pEGFP-N1-hTERT的正确性。[结果]所构建的pEGFP-N1-hTERT真核表达载体结构正确并能够在真核细胞中表达。[结论]该研究为建立大鼠永生化NSCs系奠定了基础。

关键词(KeyWords): GFP;hTERT;真核表达载体;构建;鉴定

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家“863”计划项目(2002AA216161)

作者(Author): 李勇;李军;吕长荣;窦忠英;

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参考文献(References):

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