安徽农业科学

2015, v.43;No.491(22) 83-86

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蝙蝠TRAIL基因的克隆·表达及生物学功能分析
The Cloning,Expression and Biological Function of the Bat TRAIL Gene

裴丽丽;侯欢欢;卢佳;闫伟莉;任文华;

摘要(Abstract):

[目的]克隆蝙蝠TRAIL基因,构建蝙蝠可溶性TRAIL原核表达栽体,研究其对肿瘤细胞凋亡的影响。[方法]通过RT-PCR技术克隆蝙蝠TRAIL的全长c DNA序列,实时荧光定量PCR鉴定其组织分布,将其可溶性片段与表达载体p ET43.1a连接,并在大肠杆菌BL21中高效表达和纯化,通过western blotting证实。体外,通过MTT、Trypan Blue和流式细胞术检测纯化的可溶性TRAIL蛋白能否诱导肿瘤细胞的凋亡。[结果]成功克隆蝙蝠TRAIL基因,构建了重组表达载体,获得可溶性TRAIL蛋白。体外试验证明,可溶性蝙蝠TRAIL蛋白能够诱导Jurkat细胞和He La细胞的凋亡。[结论]可溶性蝙蝠TRAIL蛋白可诱导肿瘤细胞凋亡,该研究为蝙蝠免疫系统的研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): TRAIL;蝙蝠;荧光实时定量PCR;细胞凋亡

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31370401);; 江苏省高校优势学科建设工程项目(PAPD)

作者(Author): 裴丽丽;侯欢欢;卢佳;闫伟莉;任文华;

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