安徽农业科学

2014, v.42;No.447(14) 4199-4201

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拟南芥bZIP23基因过量表达载体的构建及过表达植株的筛选
Construction of Arabidopsis Gene bZIP23 Overexpression Vector and Screening of Expression Plant

顾菊;韩娇;董万春;阳立波;曹树青;

摘要(Abstract):

[目的]以拟南芥为材料克隆bZIP23基因,构建bZIP23基因的过量表达载体和筛选过表达植株,为验证其功能奠定基础。[方法]提取拟南芥总RNA和RT-PCR克隆bZIP23基因,用限制性内切酶切割和T4 DNA连接酶连接,使bZIP23基因连接到35S强启动子的pART27载体上;将连接产物转化到Trans1-T1感受态细胞中,筛选阳性单克隆进行菌落PCR鉴定并测序验证,获得重组质粒。将该重组质粒电激转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,浸花法转化拟南芥野生型植株。[结果]通过单菌落PCR鉴定和DNA测序结果显示,bZIP23基因与35S过量表达载体已连接,获得了重组载体;抗性筛选与遗传鉴定获得相应的转基因过量表达阳性植株。[结论]构建的过量表达载体及筛选得到的过量表达植株为验证bZIP23基因功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): 拟南芥(Arabidopsis athaliana);bZIP23;互补和过量表达载体;转基因植株

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 高等学校博士学科点基金(20120111110009);; 安徽省青年科学基金资助项目(1308085QC56)

作者(Author): 顾菊;韩娇;董万春;阳立波;曹树青;

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DOI:

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