安徽农业科学

2016, v.44;No.508(03) 85-87+95

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蜂蜜蛋白提取以及双向电泳技术分析蜂蜜蛋白条件优化
Extraction of Protein from Honey and Its Optimization by Two-dimensional Electrophoresis

周莉质;宗凯;吕侠影;余晓峰;姚剑;

摘要(Abstract):

[目的]研究蜂蜜中蛋白质提取的有效方法,优化蜂蜜蛋白电泳条件。[方法]该试验使用丙酮、钨酸钠、硫酸铵、尿素-硫脲4种方法提取蜂蜜中的蛋白并进行比较,然后进行双向电泳分析,对影响双向蛋白电泳的IPG胶条的选择、蛋白质上样量、等电聚焦时间等主要因素进行优化。[结果]试验表明,采用硫脲法提取蜂蜜蛋白获得的蛋白含量最高,硫脲法和丙酮沉淀法获得的蛋白纯度最好,而硫脲法因干扰物质较少、易于裂解适于双向电泳技术,采用硫脲法提取的蜂蜜蛋白选择IPG胶条p H 5~8,蛋白上样量为150μg,等电聚焦时间达到32 000 V·h的情况下能充分地聚焦,获得的双向电泳图谱最佳,优化后的洋槐蜜双向电泳图谱上可检测到326个蛋白点,重复性和分辨率均较好。[结论]蜂蜜类含糖样品中使用硫脲法提取蛋白能减少糖类物质干扰。

关键词(KeyWords): 蜂蜜蛋白;双向电泳;蛋白提取

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家质检总局科技计划项目(2014IK087)

作者(Author): 周莉质;宗凯;吕侠影;余晓峰;姚剑;

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参考文献(References):

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