安徽农业科学

2012, v.40;No.371(10) 5797-5799

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油橄榄ISSR-PCR反应体系优化与引物筛选
Optimization of ISSR-PCR Reaction System and Primer Selection for Olea euyopaea

李瑞;陈少瑜;宁德鲁;李勇杰;毛云玲;

摘要(Abstract):

[目的]对油橄榄ISSR-PCR反应体系进行优化,并筛选出多态性ISSR引物。[方法]以油橄榄嫩叶片提取的基因组DNA为模板,通过单因子试验针对反应体系主要因子Mg2+、dNTPs、引物浓度及模板用量进行油橄榄ISSR-PCR反应体系优化。[结果]优化的油橄榄ISSR-PCR反应体系为:总体系20μl中含1×Taq Buffer,3.5 mmol/L Mg2+,0.4 mmol/L dNTPs,1.0μmol/L引物,1.0 U Taq DNA聚合酶,20 ng DNA模板。反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,52~55℃退火30 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。同时利用上述反应体系和反应程序筛选出了扩增稳定、多态性高、扩增条带清晰的ISSR引物11条。[结论]为进一步油橄榄种质资源的多样性研究和品种鉴定奠定了基础。

关键词(KeyWords): 油橄榄;基因组DNA;体系优化;引物筛选

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 云南省重点新产品开发计划项目(2009BB006)

作者(Author): 李瑞;陈少瑜;宁德鲁;李勇杰;毛云玲;

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参考文献(References):

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