安徽农业科学

2009, v.37;No.v.37(23) 10917-10921

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用于SSR分析的大豆干种子DNA提取条件的优化
Optimization of the Conditions for Extracting DNA for SSR Analysis from Dry Soybean Seeds

姚丹;张扬;曲静;张迪;王丕武;

摘要(Abstract):

[目的]探讨适于SSR分析的大豆干种子DNA提取的最佳方法。[方法]以2个大豆品种的干种子为材料,分别采用改良SDS法和CTAB法提取大豆基因组DNA,用1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量,用紫外分光光度计分别测定其DNA在A230、A260和A280下的吸光值,根据A260/A230和A260/A280的比值检测DNA的纯度和浓度,并分别以两种DNA为模版进行SSR-PCR扩增。[结果]相同DNA提取条件下,SDS法提取DNA样品的纯度和浓度均高于CTAB法,SDS终浓度为2%(W/V),水浴15 min,氯仿/异戊醇抽提2次时所提取大豆种子DNA的纯度及浓度最高,其DNA的OD260/OD280值为1.86,SDS法所提的DNA泳带分布较集中,无拖尾现象,其DNA浓度能够满足SSR扩增模板的需求。[结论]SDS浓度为2%(W/V),水浴15 min,氯仿/异戊醇抽提2次时提取大豆干种子DNA的浓度和纯度都较高,可以满足后续的各种分子生物学操作的要求。

关键词(KeyWords): 大豆;干种子;基因组DNA;提取

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 吉林省科技厅重大项目(20060202)

作者(Author): 姚丹;张扬;曲静;张迪;王丕武;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.23.080

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