安徽农业科学

2020, v.48;No.642(05) 197-200

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薏苡黑穗病快速检测方法研究
Study on Rapid Detection Method of Coix lacryma-jobi Smut

王健;杨成龙;杨小雨;周明强;

摘要(Abstract):

以薏苡黑穗病菌粉胞内蛋白为免疫原,制备抗体,建立薏苡黑穗病ELISA检测方法。结果表明,测定纯化后抗体的最高效价为1∶800 000,具特异性强;方阵试验测定抗原的最佳包被浓度为10~3 CFU/mL,抗体的工作浓度为1∶4 000;优化ELISA检测条件,确定抗体4℃过夜(8~12 h)包被效果最好,选择1%酪蛋白作为抗体的封闭液,抗体的最佳封闭时间为1.5 h,抗体的最佳孵育时间为2.5 h,最佳底物作用时间为15 min;建立ELISA标准工作曲线,表明抗体的灵敏度为10~4 CFU/mL。ELISA检测田间采集的黑穗病病叶显示,抗体可与病叶提取液发生特异性反应,而与健康叶提取液呈阴性反应,由此可确定黑穗病的存在与否。该方法可用于田间薏苡黑穗病快速检测,以及时指导病害防治。

关键词(KeyWords): 薏苡黑穗病;抗体;酶联免疫反应

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31760423);; 贵州省科技厅、贵州省农业科学院联合项目(黔科合LJH字[2014]7709,黔科合LJH字[2014]7683);; 贵州省第五批人才基地项目(黔人领发[2016]22号);; 贵州省农业科学院院专项(黔农科院院专项[2016]019号);; 贵州农业科技支撑项目(黔科合支撑[2017]2508)

作者(Author): 王健;杨成龙;杨小雨;周明强;

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