安徽农业科学

2008, (07) 2679-2681

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猪细小病毒(PPV)SD1株NS1基因的克隆与原核表达
Cloning and Prokaryotic Expression of NS1 Gene of Porcine Parvovirus(PPV) SD1 Strain

谢金文;沈志强;王金良;任艳玲;管宇;苗立中;

摘要(Abstract):

[目的]为建立猪细小病毒的快速诊断方法提供理论依据。[方法]根据GenBank上猪细小病毒基因组序列和原核表达质粒pET30a(+)多克隆位点序列设计1对引物,应用PCR技术扩增出猪细小病毒SD1株NS1基因全序列,对阳性重组质粒进行测序和同源性比较。构建原核表达重组质粒pET 30a/NS1,并在大肠杆菌中进行诱导表达。[结果]通过PCR扩增获得2 208 bp目的片段。所克隆NS1基因与已报道的PPV相应基因的核苷酸同源性为97.3%~99.4%,表明NS1基因具有高度保守性,但在偏3′端连续缺失12个碱基。所克隆的PPVNS1基因在原核细胞中成功表达,其表达产物主要以包涵体形式存在。[结论]SDS-PAGE检测结果表明PPVNS1蛋白的分子量为86 kD。

关键词(KeyWords): 猪细小病毒;NS1基因;克隆;原核表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 山东省自然科学基金项目(Y2005D10)

作者(Author): 谢金文;沈志强;王金良;任艳玲;管宇;苗立中;

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