安徽农业科学

2010, v.38;No.291(02) 600-601+619

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一种适用于PCR的土壤微生物DNA的提取方法
An Extraction Method of Soil Microbial DNA for PCR Analysis

李惠敏;胡雪英;秦新民;

摘要(Abstract):

[目的]对土壤微生物的DNA进行提取,以建立一种适用于PCR技术分析的土壤微生物DNA的快速提取方法。[方法]采用了2种不同的直接裂解法提取土壤微生物DNA,并用细菌通用引物27F和1492R进行PCR扩增16S rDNA片段。[结果]2种方法提取的土壤微生物总DNA电泳结果显示没有差别,但是只有CTAB、溶菌酶、冻融裂解法提取的总DNA不需要纯化,在增加Mg2+用量的条件下,只需用第一轮非特异PCR产物作为模板即可扩增出16S rDNA片段。[结论]CTAB、溶菌酶、冻融裂解法提取土壤DNA,方法操作简单、快捷,同时适用于PCR分析,为土壤微生物群落结构的多样性分析奠定了基础。

关键词(KeyWords): 土壤微生物DNA;提取;PCR;16SrDNA

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广西师范大学第三批青年骨干教师资助计划(2007)

作者(Author): 李惠敏;胡雪英;秦新民;

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