安徽农业科学

2009, v.37;No.280(27) 12960-12961+13009

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双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒
Detection of Two Main Orchid Viruses with the Method of Double One-step RT-PCR

柳爱春;赵芸;刘超;张乐;

摘要(Abstract):

[目的]研究建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)双重一步法RT-PCR检测方法,为病毒的早期快速诊断提供技术支持。[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物,并进行双重与单一RT-PCR对比试验。[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV与预期相符的约764和946 bp扩增产物条带;且双重一步法RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,出现两条与单一RT-PCR产物相对应的清晰条带,获得较理想的检出效果;扩增产物的核酸序列经BLAST分析,同源性均在85%以上,证实了检测结果的准确性。[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点,适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测。

关键词(KeyWords): 建兰花叶病毒;齿兰环斑病毒;双重一步法RT-PCR

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 杭州市科技发展计划项目(20070132N09)

作者(Author): 柳爱春;赵芸;刘超;张乐;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.27.116

参考文献(References):

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