安徽农业科学

2018, v.46;No.607(30) 99-101

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柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的原核表达及纯化
Okaryotic Expression of VP1 Protein of Coxsackie Virus Group A 16 Strain and Purification

潘朋歌;李克生;杜惠芬;曾潮宁;

摘要(Abstract):

[目的]原核表达并纯化柯萨奇病毒A组16型(CVA16) VP1蛋白。[方法]根据Gen Bank CVA16 VP1基因序列,合成VP1全基因,连接到载体p ET30a,构建原核表达质粒p ET30a-CVA16-VP1。将测序正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组蛋白。[结果]成功构建重组质粒p ET30a-CVA16-VP1,表达蛋白经SDS-PAGE显示分子量约为38.7 k Da,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白经复性、纯化,纯度达90%以上;经Western Blot检测,证实表达的蛋白为VP1蛋白。[结论]成功获得了高纯度的VP1蛋白,为此抗原用于临床诊断打下了基础。

关键词(KeyWords): 柯萨奇病毒A组16型(CVA16);VP1蛋白;原核表达;纯化

Abstract:

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 潘朋歌;李克生;杜惠芬;曾潮宁;

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