安徽农业科学

2009, v.37;No.269(16) 7348-7350+7352

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拟南芥组蛋白甲基化酶SUVH6中SRA结构域基因的克隆及表达
Cloning and Expression of SRA Domain Gene in Histone Methylation Enzyme SUVH6 from Arabidopsis thaliana L.

谭玉霞;王显国;刘荣堂;

摘要(Abstract):

[目的]研究甲基化修饰对遗传基因调节的作用。[方法]利用拟南芥RNA反转录得到的cDNA序列为模板,克隆出SUVH6-SRA基因,并成功构建了含有SUVH6-SRA基因的表达载体pMAL-c2P-SUVH6-SRA,然后将pMAL-c2P-SUVH6-SRA质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达带有MBP标签的SUVH6-SRA融和蛋白。[结果]pMAL-c2P-SUVH6-SRA克隆在转化到大肠杆菌BL21(DE3)后,在37℃条件下,经过终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导,大肠杆菌BL21(DE3)能够获得大量可溶性MBP-SUVH6-SRA融和蛋白并顺利表达,SDS-PAGE显示诱导表达的融和蛋白相对分子质量为66.0 kDa左右,与预测的结果相吻合。[结论]在MBP与目的蛋白之间引入了PPE酶切位点,可使MBP和SUVH6蛋白分离,并在使用MBP亲和层析和PPE酶切后,获得了纯度较高的SUVH6蛋白,表明成功构建了SUVH6-SRA-MBP融和蛋白原核表达系统。

关键词(KeyWords): SRA;组蛋白;甲基化;拟南芥;MBP融和蛋白

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 谭玉霞;王显国;刘荣堂;

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