安徽农业科学

2011, v.39;No.360(35) 21644-21646

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药用植物青天葵叶片原生质体的制备与纯化
Preparation and Purification of Protoplast from Nervilia fordii(Hance) Schltr.Leaves

张晓丽;何瑞;童家赟;詹若挺;林超;

摘要(Abstract):

[目的]研究青天葵原生质体的制备与纯化方法。[方法]以青天葵新鲜叶片为试验材料,以青天葵叶片原生质体产量及原生质体存活率为考察指标,研究了预处理、酶解方式、酶解温度、离心转速、光照、筛网目数等因素对青天葵原生质体分离纯化效果的影响。[结果]适宜青天葵叶片原生质体游离的条件是用浓度13%甘露醇溶液预处理叶片1 h、酶解温度(25±1)℃、黑暗、静置;原生质体纯化采用离心沉淀法,以200目筛网过滤后离心8 min(800 r/min),操作2次,可得到大量完整清晰、细胞碎片少的原生质体。[结论]该方法获得了制备青天葵原生质体的理想条件与参数,为建立青天葵原生质体再生体系提供了依据。

关键词(KeyWords): 青天葵(LEAF OF FORD NERVILIA);叶片;原生质体(protoplast);分离

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(30701090);; 教育部留学回国人员科研项目(教外司留[2009]1001号)

作者(Author): 张晓丽;何瑞;童家赟;詹若挺;林超;

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