周智慧;高波;王升智;岑宁;

• 1:扬州大学动物科学与技术学院

摘要(Abstract)：

[目的]探讨不同重组大肠杆菌菌株保存的方法,找出其保存的最适条件。[方法]以携带质粒pcDNA3的大肠杆菌DH5α为研究对象,分析了4℃冷藏和-70℃冷冻保存对菌株活性的影响。[结果]4℃条件下,高稀释度的菌液中活细胞数随着时间的延长而逐渐上升,到第7天时达到最高峰,随后呈现逐渐下降的趋势-70℃条件下,菌液OD600值为0.8,甘油终浓度为8%的处理组,在各保存时间段的活细胞数均显著高于其他组。[结论]4℃短期保存重组菌株时,菌液最佳存放时间为7 d左右;-70℃长期保存时,宜采用对数生长期的细菌,且保持甘油工作浓度8%为宜。

关键词(KeyWords)： 重组大肠杆菌;保存方法;活细胞

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 江苏省自然科学基金项目(BK2007555);; 扬州大学自然科学创新培育基金项目(2008CXJ032)

作者(Author): 周智慧;高波;王升智;岑宁;

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DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.01.011

参考文献(References)：

• [1]白毓谦.微生物实验室技术[M].济南:山东大学出版社,1986:403.
• [2]张秀珍.当代细菌检验与临床[M].北京:人民卫生出版社,1994:73-77.
• [3]马洪波,冯子力,谭华.菌(毒)种保存及复苏技术[J].中国国境卫生检疫杂志,2006,29(4):243-247.
• [4]潘佩蕾,林美爱,周芳美,等.脱脂牛奶低温法保存微生物菌种的研究[J].临床和实验医学杂志,2006,5(4):352-353.
• [5]吴茂红,吴时耕.菌种的保存方法介绍[J].江西医学检验,2004,24(6):545-546.
• [6]张怀强,刘玉庆,刘波,等.分批培养条件下细菌群体生长阶段的区分及生长参数的确定[J].中国科学:C辑,2005,35(6):502-512.
• [7]张怀强,卢丽丽,阎雪岚,等.细菌群体异质性对生长动态过程的影响及其表征[J].中国科学:C辑,2007,37(2)246-256.
• [8]张汉波,丁弊孙.细菌群体的异质性[J].微生物学通报,2001,28(2):93-96.
• [9]HOLMSTROM K,TOLKER-NIELSEN T,MOLIN S.Physiological states ofindividualSalmonella typhimuriumcellsmonitored by in situ re-verse tran-scription-PCR[J].Joumal of Bacteriology,1999,181:1733-1738.
• [10]TOLKER-NIELSEN T,HOLMSTROM K,MOLIN S.Visualization of spe-cific gene expression inSalmonella typhimuriumby in situ PCR[J].ApplEnvM icrobiol,1997,63:4196-4203.