致病性嗜水气单胞菌气溶素基因PCR检测方法的建立Detection Method of the Aerolysin Gene in Pathogenic Aeromonas hydrophila Based on Polymerase Chain Reaction
葛晨霞;李月红;张培军;吴东明;付云红;
摘要(Abstract)：
[目的]建立一种基于PCR的致病性嗜水气单胞菌的检测方法。[方法]采用平板划线法从患病鲫鱼病灶部位分离、纯化获得嗜水气单胞菌,采用CTAB法提取DNA,根据GenBank已经登录的致病性嗜水气单胞菌气溶素基因保守序列设计引物P1和P2,并以P1、P2为引物对其进行PCR扩增,将测序结果在Blast上进行比对分析。[结果]PCR扩增得到一条约540 bp的条带,Blast分析表明该基因与GenBank登录的气溶素基因的同源性达95.67%。[结论]试验建立的致病性嗜水气单胞菌气溶素基因PCR检测方法简单、可行。
关键词(KeyWords)： 嗜水气单胞菌;气溶素基因;PCR
基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30972191);; 吉林省科技厅科技发展计划项目
作者(Author): 葛晨霞;李月红;张培军;吴东明;付云红;
Email:
DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.34.148
参考文献(References)：
- [1]吴会民,林文辉,石存斌.嗜水气单胞菌研究概述[J].河北渔业,2007(3):7-11.
- [2]沈素芳,楚卫华,陆承平.鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒的研制[J].中国兽医学报,2000,20(5):462-464.
- [3]马家好,李学勤,王振英,等.Dot-ELISA快速检测鱼类运动性气单胞菌的研究[J].大连水产学院学报,1997,12(3):72-78.
- [4]李学勤,王振英,马家好,等.淡水鱼类主要细菌性传染病快速诊断的研究[J].中国兽医学报,1997,17(1):33-35.
- [5]陈怀青,陆承平,陈琼,等.用点酶法检测鱼类致病性嗜水气单胞菌HEC毒素[J].动物检疫,1993,10(4):60-62.
- [6]杨本升.动物微生物学[M].长春:吉林科学技术出版社,1995:177-184.
- [7]王利.鱼类嗜水气单胞菌的几种检测方法[J].中国兽药杂志,2002,36(8):38-40.
- [8]徐小林,陆承平.嗜水气单胞菌毒素的提纯及其特性分析[J].微生物学报,1992,32(6):432-438.
- [9]卢强,任瑞文,王文东,等.致病性嗜水气单胞菌气溶素基因PCR检测方法的建立[J].中国兽医学报,2001,21(4):347-349.
- [10]刘秀梵.单克隆抗体在农业上的应用[M].合肥:安徽科学技术出版社,1994:26-30.
- [11]朱大龄,李爱华,钱冬,等.嗜水气单胞菌毒力基因的研究进展[J].水生生物报,2004,28(1):79-84.
- [12]刘永杰,陆承平.嗜水气单胞菌弹性蛋白酶纯化及特性分析[J].中国兽医学报,2006,26(1):54-56.
- [13]钱冬,陈月英.引起鱼类暴发性流行病的嗜水气单胞菌的血清型,毒力及溶血性[J].微生物学报,1999,23(3):288-289.